| Nach der Probenentnahme erfolgt die Extraktion der DNA aus dem Knochenmaterial. Dazu werden die entnommenen Proben zunächst zu Knochenpulver zerkleinert. Das Probenmaterial wird dabei in zirkoniumoxidbeschichteten Mahlbechern in einer Kugelschwingenmühle zermahlen. Im Anschluss an diese mechanische Zerkleinerung erfolgt die chemische Aufspaltung des Knochenpulvers um das Hydroxilappatit des Knochens aufzuspalten und somit die Osteocyten freizulegen. Am Ende dieses Lysierungsschrittes ist die DNA aus dem Knochenmaterial herausgelöst und kann nun durch Phenol-Chlorophorm-Extraktion von den übrigen Zellbestandteilen isoliert und aufgereinigt werden.
Im Anschluss erfolgt ein weiterer Aufreinigungsschritt, bei der die DNA durch Filtermembranen von weiteren Verunreinigungen getrennt und aufkonzentriert wird. Das erhaltenen DNA-Extrakt kann nun in einer anschließenden PCR (Polymerasekettenreaktion) zur Verfielfältigung eines bestimmten Genortes verwendet werden. |
|
Johannes Gutenberg Universität
Seitenanfang
Raumansicht
